Problema protejarii rusului din vaccin fata de efectele caldurii este ioarte veche. Primele incercari moderne reusite de conservare se datoresc lui Otten , care a reusit sa usuce pulpa vaccinala in d in prezenta acidului sulfuric. Aceasta este folosita si in prezent .
La fiecare gram de limfa de bivol se adauga, pentru distrugerea florei microbiene, 0,5 ml Synchrobina si ca silizator 0,5 ml peptona 5%.
Dupa trecerea limfei de 5 ori printr-o moara Challibaeus, suspensia este pusa in cutii Petri, grosimea stratului fiind de 0,5 cm. Cutiile Petri se pun in exsicatoare care contin acid sulfuric si in care se face d timp de 25 de ore.
Materialul uscat este triturat intr-o pulbere fina, care se repartizeaza in tuburi de sticla ce sint tinute in d de 0,065 mm Hg la temperatura camerei timp de 5 ore dupa care sint inchise.
Vaccinul obtinut rezista citeva zile la +58A si citeva luni la temperaturi cuprinse intre 57 si +42A. S-a demonstrat ca dupa 8 ani de la preparare si mentinerea la temperatura de aproximativ 22A, vaccinul liofilizat putea determina la primovaccinati o reusita in 85A n din cazuri .
Pentru protejarea rusului fata de actiunea caldurii s-a incercat folosirea de substraturi inerte (lanolina, vaselina), dextrina, dextran, glucoza glutaminata, albumine bone, ser normal de cal, cistina, d-alanina, lapte degresat, galbenus, peptona, Twcen 80 ctc. . Rezultate mai bune s-au obtinut cu o solutie de peptona 5%.
Un pas inainte a fost facut in momentul introducerii liofilizarii in metodologia prepararii vaccinurilor uscate din pulpa vaccinala recoltata de pe animale, din culturi celulare sau membrane corioalantoidiene infectate.
Metoda ca atare este costisitoare si oarecum dificil de utilizat pe scara industriala , deoarece liofilizarca unor suspensii de rus vaccinai nepurificate mareste insilitatea produsului .
Purificarea suspensiei vaccinalc prin centrifugari fractionate asociate cu tratare cu compusi de fluorocarbon (Arcton 63, Arcton 113) este folosita cu succes in producerea vaccinului uscat .

Introducerea bactericidului Arcton in procedeul de fabricare are avantajul ca scurteaza timpul de pastrare a suspensiei purificate la 22s si elimina necesitatea unei a doua centrifugari.
Extractia cu Arcton elimina partial materialul care nu contine rus si nu arc efecte daunatoare asupra suspensiei de rus vaccinai.In producerea vaccinului se disting mai multe etape care, indiferent de sistemul de preparare folosit (ICC) , sint, in linii mari, asemanatoare.
Dupa omogenizarea pulpei la 04A, intr-un volum de 10 ori mai mare de tampon fosfat acid citric, Mc llvainc, cu pH 7,2 si care contine 10"'o Arcton si 0,4% fenol, pulpa vaccinala este purificata intr-o prima etapa printr-o centrifugare la 1 500 rot./min. timp de 5 minute. Supcrnatantul lipsit de Arcton si resturi celulare este incubat peste noapte la +22A.
Suspensia rala trebuie sa fie lipsita de germeni patogeni si sa contina mai putin de 1 000 de bacterii pe mililitru. Ea este liofilizabila daca contine 10A U.I./ml. Daca titrul rusului este mai marc, vaccinul se mai dilueaza, dat fiind ca nu este necesar sa aiba un titru excesiv. Daca titrul este mai mic de 1X109 U.I./ml, extractul se amesteca cu un alt extract, care are un titru mai mare.Inainte de liofilizare se adauga un volum egal de peptona 10% care se prepara prin ajustarea unei solutii de peptona Difco, la pH 8, cu ajutorul unei solutii 40% de NaOH. Dupa incalzire la 90A si filtrare la cald, pH-ul este reajustat la 7,4 cu o solutie 30% IIC1, dupa care se sterilizeaza la autoclav.
Liofilizarca vaccinului se face in fiole de sticla neutra, in cantitati de 0,25 ml, intr-un liofilizator centrifugal. Ca excipient pentru liofilizare s-au obtinut rezultate bune cu peptona, glutamat de sodiu sau solutie salina tamponata .
Lscarea primara se face peste noapte sau poate fi grabita cu ajutorul caldurii, dupa ce preparatul a fost inghetat. in acest mod, uscarea se realizeaza intr-un d de 0,05 mm Hg dupa 5 ore.
Uscarea este continuata 1820 de ore intr-un d mai mare, in prezenta de P2O5. inainte de inchidere, fiolele sint umplute cu oxigen lipsit de nitrogen.
Reconstituirea vaccinului se face cu 0,25 ml glicerina 40% in tampon. Cantitatea de 0,25 ml vaccin este suficienta pentru 25 de doze indiduale.
Rezultatele obtinute prin aceasta metoda sint foarte bune, titrul minim cerut de standardele biologice este satisfacut in mod constant, iar ia primovaccinati reusita este de ICC".',,.
\ accinul este insa mai scump. Din 500 g pulpa se obtin numai 1CC00C doze si nu 200 000 cit se obtin dupa metoda obisnuita.Din cercetarile intreprinse de o serie de cercetatori rezulta ca vaccinul uscat este foarte sil !a temperaturi de peste +57A pina la +45A (T6) . Pastrat in conditii satisfacatoare, vaccinul este eficace timp de citiva ani .
Vaccinul tinut la +45A prezinta in printii doi ani o scadere a litrului de 1 log, in urmatorii doi ani raminind constant .
Unele loturi din vaccinurile pastrate citiva ani "au prins" in 100% din cazurile primovaccinate .Ind vaccinul lichid cu un vaccin uscat, s-a observat ca in rc-vaccinari vaccinul uscat a fost net superior ; utilizat in acelasi moment si la aceiasi indizi, succesul revaccinarii a fost de 62% pentru vaccinul uscat si de 33% pentru cel lichid.
Eficacitatea vaccinului uscat dupa expunere la diferite temperaturi a fost studiata prin aprecierea numarului de colonii pe membrana corio-alantoidiana, a numarului de plaje produse in culturi de celule renale de maimuta si prin scarificare pe pielea iepurilor .Intre titrul determinarii coloniilor si plajelor a fost o strinsa corelatie. O corelatie liniara a existat de asemenea intre temperatura la care a fost supus vaccinul si logaritmul de injumatatire a actitatii vaccinului la aceasta temperatura. Aceasta relatie a fost folosita pentru elaborarea unui lot de apreciere a silitatii vaccinului expus la 100A si prin extrapolare obtinindu-se perioada de injumatatire a actitatii la 37A si 45A.