Tesuturile nervoase provenite de la animalele infectate intracranial cu virus rabic fix reprezinta o sursa abundenta si economica de virus ccinam . Totusi, metodologia aplicarii ccinului, cu doze repetate zilnic, determina o proportie semnificati de accidente, intre care leziunile demielmizante ale sistemului nervos , cu etiologic similara encefalomielitei alergice experimentale , sint ce'.e mai importante.
Alcrgenul este asociat cu componenta mielinica a tesutului nervos adult (24, 89). in scopul eliminarii acestui risc au fost propuse mai multe alternative: cultirea virusului in tesuturi aviarc (ou embrionat sau culturi celulare de pasare), in tesuturi cerebrale embrionare sau in culturi celulare nenervoase.
Dintre tulpinile utilizate pentru productia de ccin antirabic in oul de gaina embrionat este larg folosita tulpina Flury izolata din creier uman si fixata prin pasaje seriate in gazde nemamifere {9i). Adaptarea la oul de gaina embrionat a fost realizata de Koprowski si Cox . Pasajele 4050 pe oul de gaina embrionat au constituit ccinul Flury LliP (low-egg-passage); titrul preparatului a fost 103IO4 DL50/0,03 ml la soarece, fiind liofilizat ca suspensie 330/0 de embrion total . Vaccinul a fost eficient si lipsit de patogenitate la dini, desi pentru bovine, pisici si pui de dine pastreaza o oarecare virulenta. Campanii largi de eradicare a rabiei la dini prin imunizare cu ccinul Flury LEP au probat loarea lui remarcabila .
Un preparat similar a fost folosit in imunizarea omului, reprezen-tind virusul rabic viu tulpina Flury la pasajul 180 pe oul de gaina embrionat
ccinul Flury HEP (high-egg-passage); Fox si colab. , Sharpless si'colab. , Ruegsegger si colab. , lierkel si Sikes au raportat incercari ce imunizare umana cu acest ccin. Utilizarea lui s-a bazat pe ideea pasteuriana a atenuarii virulentei in timpul pasajelor repetate pe tesuturi departate filogenetic de cele umane. Selectia tulpinilor cu o capacitate de replicare redusa la mamifere nu duce la clone care sa aiba definitiv fixata aceasta proprietate (144, 55, 16). Dupa unul sau doua pasaje intracerebrale la soarecele adult, Flury HEP devine patogena pentru acest animal . ceea ce implica circumspectie in utilizarea tulpinii . Vaccinul s-a dovedit capabil sa determine un bun raspuns antigenic la om, nu este enccfalitogen, dar dozele de aniigcn necesare contineau o mare cantitate de
proteine aviarc, ceea ce constituie de asemenea un risc .
Komarov si Hornstein (1953) , utilizind o tehnica similara, au selectat tulpina Kelev utilizata in productia de ccin antirabic in oul de gaina embrionat.
Dupa indicatiile comitetului de experti OMS , aceste ccinuri prezinta siguranta numai in utilizarea veterinara: Flury LFP la dine, Flury HEP la dine, lup, pisica, Kelev la dini si bovidee.
Powell si Culberston (1950) au raportat obtinerea unor tururi superioare in urma cultirii virusului rabic fix pe oul de rata embrionat, in acest mod s-a realizat un alt ccin antirabic aviar lipsit de proprietati encefalitogene si in care prezenta antigenelor nedorite (tesut de pasare) era sensibil diminuata . Titrurile suficient de inalt obtinute au permis pastrarea antigenicitatii virusului ccin chiar si dupa inactirea lui cu (3 -propiolactona (123, 122). in acest mod a fost obtinut un bun ccin inactit. Oua de rata de 7 zile sint inoculate intraamniotic cu virus fix. Embrionii vii sint recoltati in ziua a 12-aa 14-a de incubare. Se realizeaza o suspensie in solutie clorurosodica izotonica ce se purifica prin filtrare si centrifugare, inactirea facindu-se cu (3-propiolactona 3%0 (5). Antigenicitatea ccinului este abila cu a preparatelor realizate prin cultirea virusului rabic fix in tesut nervos, atit in privinta litrului de anticorpi, cit si a dinamicii aparitiei si evolutiei lor. Absenta proprietatilor encefalitogene il recomanda pentru utilizarea lui la om (182, 167). Cu toate acestea exista si comunicari care pun in dubiu eficienta ccinului preparai pe ou de rata (32, 154), iar reactiile alergice la
proteinele oului implica de asemenea un anumit grad de risc .